超微量分光光度計(jì)是一種用于微量生物分子檢測(cè)的分析儀器。設(shè)計(jì)用于測(cè)量微量樣本(通常為微升級(jí)別)中的核酸、蛋白質(zhì)等生物分子的濃度和純度。
超微量分光光度計(jì)基于紫外-可見光吸收光譜法，通過(guò)檢測(cè)特定波長(zhǎng)下的吸光度來(lái)確定樣品中目標(biāo)物質(zhì)的濃度。其核心理論基礎(chǔ)是朗伯-比爾定律，即當(dāng)一束單色光穿過(guò)含有吸收物質(zhì)的溶液時(shí)，光強(qiáng)度的減弱程度與溶液的濃度和光穿過(guò)的路徑長(zhǎng)度成正比。
超微量分光光度計(jì)的理論基礎(chǔ)是朗伯 - 比爾定律，即當(dāng)一束平行單色光通過(guò)均勻、非散射的溶液時(shí)，溶液的吸光度(A)與溶液的濃度(c)、光程(l)成正比，其數(shù)學(xué)表達(dá)式為 A=εcl，其中 ε 是物質(zhì)的摩爾吸光系數(shù)。儀器通過(guò)測(cè)量樣本的吸光度，在已知光程和吸光系數(shù)的情況下，就能計(jì)算出樣本的濃度。
結(jié)構(gòu)組成
樣品檢測(cè)平臺(tái)：通常由石英或高透光光學(xué)玻璃制成，表面經(jīng)過(guò)特殊處理以減少液體殘留，有固定式微量檢測(cè)槽和可移動(dòng)式納米光程芯片等設(shè)計(jì)。
光源：常用氙閃光燈、脈沖式鎢燈或 LED 等，可發(fā)出覆蓋紫外和可見光區(qū)的全光譜復(fù)合光。
單色器：一般為光柵，可將復(fù)合光色散成不同波長(zhǎng)的單色光，并篩選出特定波長(zhǎng)的光導(dǎo)向樣本。
檢測(cè)器：多為光電二極管或 CCD 陣列，能將透過(guò)樣本的光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，以便計(jì)算吸光度。
主要特點(diǎn)
樣本用量少：只需 0.5-2μL 的樣品即可進(jìn)行測(cè)量，適合處理珍貴或有限的樣品。
靈敏度高：短光程設(shè)計(jì)使其能檢測(cè)較低濃度的分析物，在靈敏度要求高的應(yīng)用中具有優(yōu)勢(shì)。
準(zhǔn)確性高：減少了樣品處理和稀釋步驟，降低了錯(cuò)誤風(fēng)險(xiǎn)，提高了測(cè)量準(zhǔn)確性。
測(cè)量快速：無(wú)需稀釋樣品，可在幾秒鐘內(nèi)完成測(cè)量，節(jié)省時(shí)間和精力。
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